Prueba molecular diferente de PCR para el Infarto Agudo de Miocardio

Se realizo un análisis mediante WESTERN BLOT de la Troponina I plasmática, biomarcador  utilizado en diagnóstico de IAM, indicando necrosis cardíaca y se comparo con las microvesículas extracelulares que participan en comunicación celular.

Método

• Se tomo una muestra de sangre en el mismo momento que para el estudio de TnI plasmática. El plasma fue almacenado a -80ºC.

• Análisis de troponina-I plasmática se realizó empleando Western Blot a partir de la solución de MVEC-ExoQ obtenida mediante ExoQuick®, se tomaron 40 μL y se mezclaron con 40 μL de Buffer de lisis comercial (Roche). La concentración de proteínas fue determinada utilizando el kit comercial Micro-BCA (Thermo Scientific).

• Para la medición se realizó un gel de electroforesis.  

Referencias Bibiograficas:

- Hevia D., et al. En el Infarto agudo al miocardio los niveles plasmáticos de microvesículas extracelulares se elevan más precozmente que el aumento de la Troponina-I [Internet] 2017. [citado 26 Mayo 2019] . Disponible en: hthttps://scielo.conicyt.cl/pdf/rchcardiol/v36n1/art03.pdf 

Prueba de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en el Infarto Agudo de Miocardio

1. TEMA: Análisis de epistasia de polimorfismos de genes metabólicos asociados a cardiopatía isquémica en Yucatán. 

2. OBJETIVO:  Determinar el efecto de epistasia de 6 polimorfismos de genes metabólicos y su interacción con factores de riesgo cardiovascular, e identificar un modelo de predicción de riesgo para CI en pacientes yucatecos.

3. TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA:  2 ml de sangre periférica

4. TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO A SER EXTRAÍDO: ADN genómico

5. GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: 

• MTHFR  (C677T) (rs1801133)               233 pb

                    (A1298C) (rs1801131)               163 pb

• GSTT1                                                969 pb 
• PON1      (-108CT)

                       (Q192R)

                          

                       (L55 M)

     

     Extracción: Método de precipitación salina descrito por Bunce

     Enzimas: enzima de restricción TaqI y enzima de restricción MboII (ThermoScientific)

6. TIPO DE PCR:

•  Reacción en cadena de la polimerasa con análisis de la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLP).

         D: 94°C    5min

         H: .....                          35 ciclos

         E: 72°C    5min     

• PCR múltiple

         D: 94°C    3min

         H: .....                          35 ciclos

         E: 69°C    10min     

• PCR en tiempo real 

7. VISUALIZACIÓN: EFO

Sensibilidad y Especificidad: No tiene

Referencias Bibiograficas:

- García-González I, et al. Análisis de epistasia de polimorfismos de genes metabólicos asociados a cardiopatía isquémica en Yucatán. Clin Investig Arterioscler. [Internet] 2018. [citado 19 Mayo 2019] . Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0214916817301390 

Prueba de Tamizaje y Cofirmatoria para el Infarto Agudo de Miocardio

Prueba de Tamizaje

El estudio de perfusión de miocardio con SPECT: Permite evaluar la función del corazón, el movimiento de sus paredes, irrigación del miocardio y su fuerza muscular.

Es una prueba utilizada para el diagnóstico y el pronóstico del IAM pues provee la información sobre el territorio arterial coronario afectado y la extensión de miocardio en riesgo para la prevención de la enfermedad cardiaca.

Se realiza luego de la inyección a la vena de material radioactivo, que circula en el sistema vascular y arterias coronarias, así se define si el miocardio esta recibiendo oxígeno y circulación adecuada a través de las arterias coronarias.

Homocisteína: La HC total circulante elevada es un potente marcador pronóstico de enfermedad cardiovascular y mortalidad en pacientes con factores de riesgo preexistentes. 

Prueba Confirmatoria 

Electrocardiograma: En cuanto existe la mínima sospecha de infarto, se procede a realizar un electrocardiograma que confirme o descarte dicha sospecha.

Es una prueba sencilla y rápida que consiste en la representación gráfica de la actividad eléctrica del corazón. Las alteraciones en el trazado son imprescindibles para la detección de enfermedades cardiacas. El patrón electrocardiográfico más importante en un IAM es el denominado "elevación del ST y onda Q".

Referencias Bibiograficas:

- Massardo T, et al. Estratificación de riesgo de enfermedad coronaria con métodos isotópicos. Estado actual de la práctica clínica. Rev Esp Med Nucl [Internet] 2017. [citado 11 Mayo 2019] . Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2253654X17301002?via%3Dihub 

- Ramos M., López P.,  Robert L., Cabrera O. Homocysteine, a marker of vascular risk. Literature Review. Mediciego [Internet] 2016. [citado 11 Mayo 2019]; 22(4). Disponible en: https://www.medigraphic.com/pdfs/mediciego/mdc-2016/mdcs161i.pdf

- Garrido L., González R. ECGEstudio:Tool for the diagnosis of cardiovascular diseases. RCIM [Internet] 2015. [citado 11 Mayo 2019]; 7(2): 93-99 Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1684-18592015000200005

Alteración de la Epigenómica del Infarto Agudo de Miocardio

En el desarrollo de las enfermedades cardiovasculares intervienen tanto factores ambientales, como factores genéticos. Las modificaciones epigenéticas constituyen un puente entre ambos, de modo que los agentes externos como la edad, el tabaco, o la obesidad pueden iniciar procesos que lleven a cambios en el epigenoma que influyan en la regulación de la expresión génica.

La obesidad abdominal es el factor de riesgo con el mayor valor de riesgo poblacional de IAM. El exceso de grasa acumulada en las vísceras, relacionado con la obesidad central, es el tejido adiposo metabólicamente más activo que causa más resistencia a la insulina, hipertrigliceridemia, cambios en el tamaño de partículas cLDL y bajas concentraciones de cHDL. 

Investigadores analizaron el patrón de metilación del ADN en muestras de sangre, se encontró diferencias en la metilación que se localizaban en 196 genes, de los cuales 42 habían sido relacionados previamente con la función cardiaca, y a daños por isquemia; esto apuntan a un posible papel de las modificaciones epigenéticas en la patogénesis del infarto de miocardio.

Referencias Bibiograficas:

- Rask-Andersen, M., Martinsson, D., Ahsan, M., Enroth, S., Ek, W. E., Gyllensten, U., Johansson, A. Epigenome-wide association study reveals differential DNA methylation in individuals with a history of myocardial infarction. HGM. [Internet] 2016. [citado 4 Mayo 2019] . Disponible en: https://sci-hub.tw/10.1093/hmg/ddw302

- Cisneros L., Carrazana E. Risk factors in ischemic heart disease Rev Cubana Med Gen Integr [Internet] 2013. [citado 4 Mayo 2019]; 29(4) Disponible en: http://scielo.sld.cu/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0864-21252013000400010

- Jaramillo P., Cohen D., Gómez D., Velandia C., Sotomayor A., Rincón K. Papel de las adaptaciones epigenéticas en el riesgo de enfermedades cardiovasculares en la población latinoamericana. Revista Med [Internet] 2011. [citado 4 Mayo 2019]; 19(1): 93-99 Disponible en: http://www.scielo.org.co/pdf/med/v19n1/v19n1a10