Prueba de la Reacción en Cadena de la Polimerasa (PCR) en el Infarto Agudo de Miocardio

1. TEMA: Análisis de epistasia de polimorfismos de genes metabólicos asociados a cardiopatía isquémica en Yucatán. 

2. OBJETIVO:  Determinar el efecto de epistasia de 6 polimorfismos de genes metabólicos y su interacción con factores de riesgo cardiovascular, e identificar un modelo de predicción de riesgo para CI en pacientes yucatecos.

3. TIPO DE MUESTRA BIOLÓGICA:  2 ml de sangre periférica

4. TIPO DE ÁCIDO NUCLEICO A SER EXTRAÍDO: ADN genómico

5. GEN O SECUENCIA A AMPLIFICAR: 

• MTHFR  (C677T) (rs1801133)               233 pb

                    (A1298C) (rs1801131)               163 pb

• GSTT1                                                969 pb 
• PON1      (-108CT)

                       (Q192R)

                          

                       (L55 M)

     

     Extracción: Método de precipitación salina descrito por Bunce

     Enzimas: enzima de restricción TaqI y enzima de restricción MboII (ThermoScientific)

6. TIPO DE PCR:

•  Reacción en cadena de la polimerasa con análisis de la longitud de los fragmentos de restricción (PCR-RFLP).

         D: 94°C    5min

         H: .....                          35 ciclos

         E: 72°C    5min     

• PCR múltiple

         D: 94°C    3min

         H: .....                          35 ciclos

         E: 69°C    10min     

• PCR en tiempo real 

7. VISUALIZACIÓN: EFO

Sensibilidad y Especificidad: No tiene

Referencias Bibiograficas:

- García-González I, et al. Análisis de epistasia de polimorfismos de genes metabólicos asociados a cardiopatía isquémica en Yucatán. Clin Investig Arterioscler. [Internet] 2018. [citado 19 Mayo 2019] . Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/abs/pii/S0214916817301390