Técnicas de Edición Epigenómica para el Infarto Agudo de Miocardio

TEMA: El ácido valproico, un inhibidor de HDAC, protege la función cardíaca a través de la vía de Foxm1 después de un infarto agudo de miocardio

MÉTODO EPIGENÓMICO TRATADO: Inhibición de la histona desacetilasa (HDAC)

COMO LO HIZO: El VPA se administró a ratas MI en diferentes momentos, inicio y después de la lesión de MI. Ecocardiografía , histología, análisis de biología del suero y expresión génica, inhibición y sobreexpresión se realizaron para caracterizar la función sistólica , el tamaño del infarto, el gen y las vías de señalización .

RESULTADOS: El tratamiento con VPA mejoró la función cardíaca y atenuó el daño miocárdico en ratas a las 24 h después del IM. Los tratamientos con VPA reducen significativamente el daño cardíaco después de un IM y el efecto cardioprotector del VPA probablemente esté mediado a través de la vía de Foxm1.

Referencias Bibliográficas

- Shuo Tian., lenglam Lei. HDAC inhibitor valproic acid protects heart function through Foxm1 pathway after acute myocardial infarction. EBioMedicine [Internet] 2019. [citado 30 Junio 2019]; (39) 83-94. Disponible en: https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S2352396418305747

Técnica de Edición Genómica en el Infarto Agudo de Miocardio

TEMA: Alteración permanente de PCSK9 con la edición del genoma in vivo CRISPR-Cas9

TIPO: Mutaciones de pérdida de función en el gen PCSK9 endógeno in vivo.

DIRIGIDO A: ADN genómico, dirigido a Pcsk9 en el hígado de ratón, donde el gen se expresa específicamente. 

DIRIGIDO POR: Utilizaron adenovirus para expresar Cas9 y un ARN guía CRISPR

VÍA DE ADMINISTRACIÓN: Mediante microinyección

USOS: La edición del genoma con el sistema CRISPR-Cas9 altera el gen Pcsk9 in vivo con alta eficiencia y reduce los niveles de colesterol en la sangre en ratones. Este enfoque puede tener un potencial terapéutico para la prevención de enfermedades cardiovasculares en humanos.

RESULTADO: Encontraron que dentro de los tres o cuatro días de la administración del virus, la tasa de mutagénesis de Pcsk9 en el hígado era tan alta como> 50%. Esto provocó una disminución de los niveles plasmáticos de PCSK9, un aumento de los niveles de receptor de LDL hepático y una disminución de los niveles de colesterol en plasma en la sangre. No se detectó mutagénesis fuera del objetivo en 10 sitios seleccionados. Sin efectos adversos aparentes a largo plazo.

Referencias Bibliográficas

- King A. A CRISPR edit for heart disease. Nature Intern Journal of Science. [Internet] 2018. [citado 23 Junio 2019]; 5(13). Disponible en: https://www.nature.com/articles/d41586-018-02482-4

- Ding Q., Strong A., Patel K. Alteración permanente de PCSK9 con la edición del genoma in vivo CRISPR-Cas9. PMC. [Internet] 2015. [citado 23 Junio 2019]; 115(5) 488-492. Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4134749/

Terapia con Stem Cells en el Infarto Agudo de Miocardio

TEMA: Regeneración cardíaca mediante el tratamiento con células madre derivadas de tejido adiposo cargado de nanopartículas de estatina y polímero en el infarto de miocardio

TIPO DE STEM CELLS: Células madre mesenquimáticas derivadas de tejido adiposo humano (AdSC). 

MÉTODO DE OBTENCIÓN :

• Los AdSC se aislaron del tejido adiposo. 
• Se lavó en solución tamponada con fosfato y se trituró, seguido de digestión en 5 ml de colagenasa tipo I durante 30 minutos a 37 ° C con un rotador.
• El tejido digerido se filtró a través de un filtro de células de 40 μm y se centrifugó durante 10 min. El sedimento celular se suspendió en suero bovino fetal y se colocó en placas de cultivo. Las células unidas se disociaron y se pasaron como hAdSC. 

¿PARA QUÉ FUE USADA?: Regeneración cardíaca después de un Infarto Agudo de Miocardio en un modelo de ratón IM

RESULTADOS: 

• Después de 48 horas las AdSC produjeron citoquinas pro-angiogénicas y regularon el factor IGF-1 para promover la neovascularización e inhibir la muerte celular cardiovascular. 
• A los 14 y 28 días preservó la función con un tamaño de infarto reducido que promueve la neovascularización e inhibe la apoptosis celular en el miocardio isquémico. 
• El IM cicatrizado con tejido de granulación, que se observó el día 28, fue reemplazado por el miocardio regenerado de novo el día 56. 

Referencias Bibliográficas

- Ryo Yokoyama., Masaaki Ii.  Cardiac Regeneration by Statin‐Polymer Nanoparticle‐Loaded Adipose‐Derived Stem Cell Therapy in Myocardial Infarction. Stem Cells Journal. [Internet] 2019. [citado 16 Junio 2019]; 5(13). Disponible en: https://stemcellsjournals.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/sctm.18-0244

Transgénico animal para el Infarto Agudo de Miocardio

TEMA: La supresión específica de miocitos cardiacos de la fosfolipasa A2γ (iPLA2γ) independiente del calcio disminuye los ácidos grasos oxidados durante la isquemia / reperfusión y reduce el tamaño del infarto 

TIPO DE ANIMAL TRANSGÉNICO: Ratones knock-out iPLA ₂ γ específicos para miocitos cardíacos mediante la eliminación del exón que codifica la serina del sitio activo (Ser-477). 

COMO FUE OBTENIDO: Diseñaron una eliminación inducible de iPLA2γ específica para miocitos cardíacos. Debido a la presencia de múltiples sitios de inicio de la transcripción en iPLA2γ, hicieron flotar el exón 5 que contiene el sitio activo y lo eliminaron mediante la inducción con tamoxifeno de la recombinasa Cre específica del miocito cardíaco.   

USOS: Nueva estrategia para atenuar la necrosis cardíaca y la inflamación durante los síndromes coronarios agudos y un enfoque sinérgico novedoso para el tratamiento farmacológico de los síndromes coronarios agudos y las enfermedades miocárdicas múltiples.

VENTAJAS Y DESVENTAJAS DE LOS TRANSGÉNICOS 

Referencias Bibliográficas

- Sung Ho Moon., David J., Harold F. Cardiac Myocyte-specific Knock-out of Calcium-independent Phospholipase A₂γ (iPLA₂γ) Decreases Oxidized Fatty Acids during Ischemia/Reperfusion and Reduces Infarct Size. Journal of Biolog Chim. [Internet] 2016. [citado 8 Junio 2019]; 5(13). Disponible en: http://www.jbc.org/content/291/37/19687.full

- Arriols E. Ventajas y Desventajas de los Alimentos Transgénicos. Ecología Verde [Internet] 2019 [citado 8 Junio 2019] Disponible en: https://www.ecologiaverde.com/ventajas-y-desventajas-de-los-alimentos-transgenicos-1073.html 

ADN Recombinante

Se produce un cambio del genoma y se verifica normalmente con la rotura y la reunión del ADN, con el uso de enzimas de restricción y de vectores moleculares, es posible aislar una secuencia de ADN de cualquier organismo e inserirla en el ADN de otro.

En la Naturaleza

• ADN modificado de forma natural, sin la intervención del ser humano. Pueden intercambiar segmentos y dar lugar a la aparición de nuevas combinaciones genéticas.

Recombinación V(D)J (Variable, Diversity y Joining).- Sucede en el sistema inmunitario presente en los vertebrados, es una recombinación genética donde se produce un mecanismo al azar de selección y ensamblaje de aminoácidos.
Así se puede obtener una gran cantidad de receptores TCR, e inmunoglobulinas para combatir los antígenos.

Artificial en el IAM 

La estreptoquinasa activadora de plasminógeno, disuelve los coágulos de fibrina y solubiliza los productos de degradación, por lo tanto, ayudan a la restauración de la sangre. Sin embargo, debido a su origen bacteriano, el SK natural podría tener una capacidad antigénica potencial. Esto puede evitarse mediante el uso de estreptoquinasa recombinante (rSK) que se ha producido mediante tecnología de ADN recombinante.La rSK ha demostrado ser un agente trombolítico eficaz y seguro.

Referencias Bibiograficas:

- Resino S. Generación de la diversidad: Inmunoglobulinas. EMEI. Epidemiología Molecular [acceso el 21 de julio del 2019]. Disponible en: https://epidemiologiamolecular.com/generacion-diversidad-inmunoglobulinas/

- Abdullah S., Basiouny A., Elsayed E., Mohamed A. Production of recombinant streptokinase from Streptococcus pyogenesisolate and its potential for thrombolytic therapy. Saudi Med J [Internet] 2014. [citado 2 Junio 2019]; 13(71). Disponible en: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC4362161/